सूक्ष्म प्रवर्धन

अलैंगिक जनन (asexual reproduction) द्वारा किसी किस्म (cultivar) की आनुवंशिक रूप से समान (genetically identical) प्रतियों (copies) के गुणन (multiplication) को कृन्तकीय प्रवर्धन (clonal propagation) कहा जाता है। प्रकृति में, कृन्तकीय प्रवर्धन असंगजनन (apomixis) (अर्धसूत्रीविभाजन या meiosis और निषेचन या fertilization के बिना बीज का विकास) और/या वानस्पतिक प्रवर्धन (vegetative propagation) (वानस्पतिक भागों से नए पौधों का पुनर्जनन या regeneration) द्वारा होता है। पौधों के वानस्पतिक प्रवर्धन के लिए ऊतक संवर्धन (tissue culture) एक लोकप्रिय तरीका बन गया है। कृन्तकीय प्रवर्धन की रोगाणुरहित (aseptic) विधि को सूक्ष्म प्रवर्धन कहा जाता है और यह एक ही व्यक्ति (individual) से अपेक्षाकृत कम समय और स्थान में बड़ी संख्या में सत्य-प्रकार (true-to-type) के पौधे (plantlets) पैदा करने का लाभ प्रदान करता है। यह एक तथ्य है कि अधिकांश बागवानी फसलों (horticultural crops) के कृन्तकीय प्रवर्धन के लिए सूक्ष्म प्रवर्धन ही एकमात्र व्यावसायिक रूप से जीवनक्षम (commercially viable) तरीका है। उदाहरण के लिए ऑर्किड (Orchids)।

सूक्ष्म प्रवर्धन में प्रयुक्त कर्तोतक (Explants used in micropropagation)

सूक्ष्म प्रवर्धन में विभिन्न प्रकार के कर्तोतक (explants) का उपयोग किया गया। उदाहरण के लिए, ऑर्किड के मामले में, प्ररोह शीर्ष (shoot tip) (Anacamptis pyramidalis, Aranthera, Calanthe, Dendrobium), कक्षीय कली (axillary bud) (Aranda, Brassocattleya, Cattleya, Laelia), पुष्पक्रम खंड (inflorescence segment) (Aranda, Ascofinetia, Neostylis, Vascostylis), पार्श्व कली (lateral bud) (Cattleya, Rhynocostylis gigantean), पत्ती का आधार (leaf base) (Cattleya), पत्ती का सिरा (leaf tip) (Cattleya, Epidendrum), प्ररोह शीर्ष (Cymbidium, Dendrobium, Odontioda, Odontonia), नोडल खंड (nodal segment) (Dendrobium), फूल के डंठल का खंड (flower stalk segment) (Dendrobium, Phalaenopsis) और जड़ के सिरे (root tips) (Neottia, Vanilla) का उपयोग सूक्ष्म प्रवर्धन में किया जा रहा है।

A. एक बीज वाले पौधे (seed plant) के शरीर के प्रमुख अंग और ऊतक; B. तने (stem) का क्रॉस-सेक्शन; C. जड़ (root) का क्रॉस-सेक्शन। शीर्षस्थ (Apical) या कक्षीय कलियां (axillary buds) कर्तोतक के अच्छे स्रोत हैं।

सूक्ष्म प्रवर्धन में चरण (Stages in micropropagation)

सूक्ष्म प्रवर्धन में आमतौर पर पांच चरण शामिल होते हैं। हर चरण की अपनी आवश्यकताएं होती हैं।

चरण 0: प्रारंभिक चरण (Stage 0: Preparative stage)

इस चरण में चरण 1 में रोगाणुरहित संवर्धन (aseptic cultures) की बेहतर स्थापना के लिए गुणवत्तापूर्ण कर्तोतक प्रदान करने के लिए मातृ पौधों (mother plants) की तैयारी शामिल है। बाद के चरणों में संदूषण (contamination) की समस्या को कम करने के लिए, मातृ पौधे को एक ग्लासहाउस में उगाया जाना चाहिए और पानी दिया जाना चाहिए ताकि ओवरहेड सिंचाई (overhead irrigation) से बचा जा सके। इससे कठोर नसबंदी उपचार (harsh sterilization treatment) की आवश्यकता भी कम हो जाएगी। चरण 0 में कर्तोतक की गुणवत्ता में सुधार के लिए स्टॉक पौधों (stock plants) को उपयुक्त प्रकाश, तापमान और विकास नियामक (growth regulator) उपचार के संपर्क में लाना भी शामिल है। प्रकाश संवेदनशील (photosensitive) पौधों के मामले में ग्लासहाउस में दीप्तिकाल (photoperiod) को नियंत्रित करके पूरे वर्ष उपयुक्त कर्तोतक प्राप्त करना संभव हो सकता है। उदाहरण के लिए, पेटुनिया (Petunia) के लाल-प्रकाश (red-light) उपचारित पौधों ने पत्ती के कर्तोतक प्रदान किए, जिन्होंने अनुपचारित पौधों के कर्तोतक की तुलना में तीन गुना तक अधिक प्ररोह (shoots) का उत्पादन किया।

चरण 1: संवर्धन की शुरुआत (Stage 1. Initiation of culture)

1. कर्तोतक (Explant): इन विट्रो (in vitro) प्रवर्धन के लिए उपयोग किए जाने वाले कर्तोतक की प्रकृति प्ररोह गुणन (shoot multiplication) की विधि द्वारा नियंत्रित होती है। उन्नत कक्षीय शाखाओं (enhanced axillary branching) के लिए, केवल वे कर्तोतक उपयुक्त होते हैं जिनमें पूर्व-निर्मित वानस्पतिक कली (pre-formed vegetative bud) होती है। जब उद्देश्य एक संक्रमित व्यक्ति से वायरस मुक्त (virus-free) पौधे का उत्पादन करना होता है, तो उप-मिलीमीटर (sub-millimeter) प्ररोह युक्तियों (shoot tips) के साथ शुरू करना आवश्यक हो जाता है। यदि स्टॉक का वायरस-परीक्षण किया गया है या वायरस उन्मूलन आवश्यक नहीं है, तो सबसे उपयुक्त कर्तोतक नोडल कटिंग (nodal cuttings) हैं। छोटे प्ररोह-शीर्ष (shoot-tip) कर्तोतक की जीवित रहने की दर कम होती है और यह धीमी प्रारंभिक वृद्धि दिखाते हैं। मेरिस्टेम टिप कल्चर (Meristem tip culture) के परिणामस्वरूप कुछ बागवानी विशेषताओं का नुकसान भी हो सकता है जो वायरस की उपस्थिति से नियंत्रित होते हैं, जैसे जेरेनियम (Geranium) cv. क्रोकोडाइल का स्पष्ट-शिरा (clear-vein) लक्षण। आमतौर पर, स्पष्ट शिरा लक्षण पेटियोल-खंड संवर्धन (petiole-segment culture) में प्रसारित होता है, लेकिन प्ररोह-शीर्ष संवर्धन में नहीं।
2. नसबंदी (Sterilization): विशेष सावधानियां बरतने की आवश्यकता होती है जब कर्तोतक खेत में उगाई गई सामग्री से प्राप्त होते हैं, जो अक्सर एक कुलीन पेड़ (elite tree) की क्लोनिंग (cloning) में आवश्यक होता है। ऐसे मामलों में एक आदर्श दृष्टिकोण चयनित पौधे से कटिंग लेना और उन्हें ग्रीनहाउस में उगाना होगा। कर्तोतक तैयार करते समय पौधों की सामग्री से सतह के ऊतकों को त्यागने से माइक्रोबियल संदूषण (microbial contamination) के कारण संवर्धनों के नुकसान को भी कम किया जा सकता है।
3. माध्यम का भूरा होना (Browning of medium): पौधों की कुछ प्रजातियों के संवर्धन के साथ एक गंभीर समस्या कर्तोतक की कटी हुई सतह से निक्षालित (leached out) फेनोलिक यौगिकों (phenolic compounds) का ऑक्सीकरण (oxidation) है। यह माध्यम को गहरा भूरा (dark brown) कर देता है और अक्सर ऊतकों के लिए विषाक्त (toxic) होता है। यह समस्या वुडी प्रजातियों (woody species) के वयस्क ऊतकों के साथ आम है।

3. चरण 2: गुणन (Stage 2. Multiplication)

यह सबसे महत्वपूर्ण चरण है क्योंकि यह वह बिंदु है जिस पर सूक्ष्म प्रवर्धन में अधिकांश विफलताएं होती हैं। इन विट्रो गुणन प्राप्त करने के लिए मोटे तौर पर तीन दृष्टिकोण अपनाए गए हैं।

1. कैलस के माध्यम से (Through callusing): पादप कोशिकाओं (plant cells) की संवर्धन में अनिश्चित काल तक गुणा करने की क्षमता और उनकी टोटीपोटेंट (totipotent) प्रकृति कई पौधों के प्रकारों के बहुत तीव्र गुणन की अनुमति देती है। संवर्धित कोशिकाओं से पौधों का विभेदन (differentiation) प्ररोह-जड़ निर्माण (shoot-root formation) (ऑर्गेनोजेनेसिस या organogenesis) या दैहिक भ्रूणजनन (somatic embryogenesis) के माध्यम से हो सकता है। व्यावसायिक दृष्टिकोण से दैहिक भ्रूणजनन सबसे आकर्षक है। एक बार स्थापित होने के बाद एक दैहिक भ्रूणजनन प्रणाली ऑर्गेनोजेनेसिस की तुलना में बेहतर नियंत्रण के लिए खुद को उधार देती है। चूंकि दैहिक भ्रूण (somatic embryos) द्विध्रुवीय संरचनाएं (bipolar structures) हैं, जिनमें परिभाषित जड़ और प्ररोह मेरिस्टेम (root and shoot meristems) होते हैं, माइक्रोशूट (microshoots) के लिए आवश्यक रूटिंग चरण (rooting stage) समाप्त हो जाता है। इन सबसे ऊपर, दैहिक भ्रूण छोटे, समान और द्विध्रुवीय (bipolar) होने के कारण गुणन चरण में और कृत्रिम बीज (synthetic seeds) के रूप में खेत में रोपण के लिए स्वचालन (automation) के लिए अधिक अनुकूल हैं, जिससे श्रम बचत से लागत लाभ मिलता है, इसे लंबे समय तक कोल्ड स्टोरेज, क्रायोप्रिजर्वेशन (cryopreservation) या शुष्कन (desiccation) के माध्यम से भी संग्रहीत किया जा सकता है। ये विशेषताएं दैहिक भ्रूणजनन को सूक्ष्म प्रवर्धन के लिए संभावित रूप से कम खर्चीली और लचीली प्रणाली बनाती हैं। प्ररोह गुणन के लिए कैलस कल्चर (callus cultures) के उपयोग के खिलाफ सबसे गंभीर आपत्ति उनकी कोशिकाओं की आनुवंशिक अस्थिरता (genetic instability) है।
2. अपस्थानिक कली निर्माण (Adventitious bud formation): पत्ती की धुरी या प्ररोह शीर्ष (shoot apex) के अलावा किसी भी स्थान से निकलने वाली कलियों को अपस्थानिक कलियाँ (adventitious buds) कहा जाता है। कैली (calli) से विभेदित प्ररोह को भी अपस्थानिक कलियों के रूप में माना जाना चाहिए। कई फसलों में, जड़ (ब्लैकबेरी, रास्पबेरी) और पत्ती (बेगोनिया, क्रसुला) कटिंग से अपस्थानिक कली निर्माण के माध्यम से वानस्पतिक प्रवर्धन मानक बागवानी अभ्यास है। ऐसे मामलों में संवर्धन की स्थिति के तहत अपस्थानिक कली विकास की दर को काफी बढ़ाया जा सकता है। अधिकांश बल्बनुमा पौधों (bulbous plants) (जैसे लिल्ली) के लिए अपस्थानिक कली का निर्माण गुणन का सबसे महत्वपूर्ण तरीका है और सर्वोत्तम कर्तोतक बल्ब के छिलके (bulb scales) से प्राप्त किए जाते हैं। एक गंभीर समस्या तब उत्पन्न हो सकती है जब प्रसार (propagation) की यह विधि उन किस्मों पर लागू होती है जो आनुवंशिक काइमेरा (genetic chimeras) हैं। अपस्थानिक कली निर्माण में काइमेरा के विभाजित होने का जोखिम शामिल है जिससे शुद्ध प्रकार के पौधे बनते हैं। उदाहरण के लिए, वैरीगेटेड जेरेनियम (variegated geranium) cv. Mme Salleron में, मेरिस्टेम कल्चर में काइमेरा कायम रहता है लेकिन पेटियोल कल्चर (petiole culture) में टूट जाता है।
3. उन्नत कक्षीय शाखाकरण: संवर्धन (cultures) में एक उपयुक्त साइटोकाइनिन (cytokinin) युक्त माध्यम में उपयुक्त एकाग्रता (concentration) के साथ या ऑक्सिन (auxin) के बिना प्ररोह उगाकर उन्नत कक्षीय शाखाकरण द्वारा प्ररोह गुणन की दर को काफी हद तक बढ़ाया जा सकता है। साइटोकाइनिन की निरंतर उपलब्धता के कारण, कर्तोतक पर मौजूद कली द्वारा गठित प्ररोह, कक्षीय कलियां विकसित करता है जो सीधे प्ररोह में विकसित हो सकते हैं। इस प्रक्रिया को कई बार दोहराया जा सकता है और प्रारंभिक कर्तोतक को शाखाओं के द्रव्यमान में बदल दिया जाता है।

4. चरण 3: प्ररोह में जड़ आना (Stage 3. Rooting of shoots)

दैहिक भ्रूण में एक पूर्व-निर्मित मूलांकुर (radical) होता है और यह सीधे पौधे (plantlet) में विकसित हो सकता है। हालाँकि, ये भ्रूण अक्सर पौधों में बहुत खराब रूपांतरण दिखाते हैं, विशेष रूप से इन विट्रो स्थितियों के तहत। उन्हें सामान्य अंकुरण (normal germination) की क्षमता हासिल करने के लिए परिपक्वता (maturation) के एक अतिरिक्त चरण की आवश्यकता होती है। साइटोकाइनिन की उपस्थिति में संवर्धनों में विकसित अपस्थानिक (adventitious) और कक्षीय (axillary) प्ररोह में आमतौर पर जड़ों की कमी होती है। पूर्ण पौधे प्राप्त करने के लिए प्ररोह को एक रूटिंग माध्यम (rooting medium) में स्थानांतरित किया जाना चाहिए जो प्ररोह गुणन माध्यम (shoot multiplication medium) से अलग है, विशेष रूप से इसके हार्मोनल (hormonal) और नमक (salt) रचनाओं में। जड़ने के लिए, 2 सेमी लंबाई वाले व्यक्तिगत प्ररोह को काट दिया जाता है और रूटिंग माध्यम में स्थानांतरित कर दिया जाता है।

5. चरण 4: प्रत्यारोपण (Stage 4. Transplantation)

वाणिज्यिक प्रसार (commercial propagation) की अंतिम सफलता पौधों को बड़े पैमाने पर, कम लागत पर और उच्च जीवित रहने की दर के साथ संवर्धन (culture) से बाहर स्थानांतरित करने की क्षमता पर निर्भर करती है। इन विट्रो में गुणा किए गए पौधों को विकास की स्थितियों (अकार्बनिक और कार्बनिक पोषक तत्वों, विकास नियामकों, कार्बन स्रोत के रूप में सुक्रोज, उच्च आर्द्रता, कम प्रकाश, खराब गैसीय विनिमय के उच्च स्तर) के एक अद्वितीय सेट के संपर्क में लाया जाता है जो तेजी से विकास और गुणन का समर्थन कर सकता है लेकिन पौधों में संरचनात्मक और शारीरिक असामान्यताएं (physiological abnormalities) भी पैदा कर सकता है, जिससे वे इन विवो (in vivo) स्थितियों के तहत जीवित रहने के लिए अयोग्य हो जाते हैं। इन विट्रो में उगाए गए पौधों की दो मुख्य कमियां हैं - पानी के नुकसान का खराब नियंत्रण और पोषण का परपोषी तरीका (heterotrophic mode of nutrition)। इसलिए, संवर्धन से ग्रीनहाउस (greenhouse) या खेत में संक्रमण (transition) से बचने के लिए इन पौधों के लिए क्रमिक अनुकूलन (acclimatization) आवश्यक है। अनुकूलन के दौरान इन विट्रो में बनी पत्तियां ठीक नहीं होती हैं लेकिन पौधा सामान्य पत्तियों और कार्यात्मक जड़ों (functional roots) को विकसित करता है। प्ररोह/जड़ों को बाहर स्थानांतरित करते समय उनके निचले हिस्से को धीरे से धोया जाता है ताकि उनसे चिपके माध्यम को हटाया जा सके। इसके बाद व्यक्तिगत प्ररोह या पौधों को पॉटिंग मिक्स (potting mix) में स्थानांतरित कर दिया जाता है और अकार्बनिक पोषक तत्वों की कम सांद्रता से सिंचित किया जाता है। यह संभवतः पौधों की प्रकाश संश्लेषक मशीनरी (photosynthetic machinery) को फिर से शुरू करता है, जिससे उन्हें परिवेशी सापेक्ष आर्द्रता (ambient relative humidity) में बाद की कमी का सामना करने और खेत की स्थितियों में जीवित रहने में मदद मिलती है। विभिन्न प्रकार के पॉटिंग मिश्रण जैसे पीट (peat), परलाइट (perlite), पॉलीस्टायर्न मोती (polystyrene beads), वर्मीक्यूलाईट (vermiculate), महीन छाल (fine bark), मोटी रेत (coarse sand) आदि या विभिन्न संयोजनों में उनके मिश्रण का उपयोग प्रत्यारोपण के लिए किया जाता है। प्रारंभिक 10-15 दिनों के लिए, पौधों के चारों ओर उच्च आर्द्रता (90-100%) बनाए रखना आवश्यक है, जिसके लिए उन्हें संवर्धन के दौरान अनुकूलित किया गया था। 2-4 सप्ताह की अवधि में आर्द्रता धीरे-धीरे परिवेशी स्तर (ambient level) तक कम हो जाती है।

सूक्ष्म प्रवर्धन के लाभ (Advantages of micropropagation)

1. कृन्तकीय बड़े पैमाने पर प्रवर्धन (Clonal mass propagation) - अत्यधिक बड़ी संख्या में पौधों का उत्पादन किया जा सकता है। वानस्पतिक प्रवर्धन में एक प्रारंभिक कटिंग से प्रति वर्ष 10000 पौधे प्राप्त करने के बजाय, कोई सूक्ष्म प्रवर्धन के माध्यम से एक प्रारंभिक कर्तोतक से प्रति वर्ष 1,000,000 से अधिक पौधे प्राप्त कर सकता है।
2. संवर्धन पौधों के छोटे भागों से शुरू किया जाता है - इसलिए अधिक स्थान की आवश्यकता नहीं होती है: कल्चर रूम (culture room) में \(1 m^2\) स्थान से, प्रति वर्ष 20000 - 100000 पौधों का उत्पादन किया जा सकता है।
3. रोग और वायरस मुक्त पौधों (disease and virus free plantlets) का उत्पादन। यह पौधों के अंतर्राष्ट्रीय आदान-प्रदान (international exchange) के सरलीकरण की ओर जाता है।
4. सूक्ष्म प्रवर्धन उत्पादकों को उन पौधों के उत्पादन को बढ़ाने में सक्षम बनाता है जो आम तौर पर बहुत धीरे-धीरे फैलते हैं जैसे कि नार्सिसस (Narcissus) और अन्य बल्बनुमा फसलें (bulbous crops)।
5. रोग मुक्त नई किस्मों (cultivars) का परिचय सूक्ष्म प्रवर्धन के माध्यम से संभव है।
6. बीज उत्पादन के लिए मूल पौधों के रूप में बाँझ संकरों (sterile hybrids) के वानस्पतिक प्रवर्धन का उपयोग किया जा सकता है। उदाहरण के लिए गोभी (Cabbage)।
7. रोग मुक्त पेड़ों की क्लोनिंग के लिए सबसे तेज़ तरीकों में से एक।
8. क्रायोप्रिजर्वेशन के माध्यम से इन विट्रो संवर्धन (in vitro cultures) को लंबे समय तक संग्रहीत किया जा सकता है।
9. प्रजनन चक्र (Breeding cycle) को छोटा किया जा सकता है।

सूक्ष्म प्रवर्धन के नुकसान (Disadvantages of micropropagation)

1. महंगे प्रयोगशाला उपकरण और सेवा।
2. मशीनीकरण (mechanization) के उपयोग की कोई संभावना नहीं।
3. पौधे स्वपोषी (autotrophic) नहीं होते हैं।
4. खेत में खराब अनुकूलन एक आम समस्या है (हाइपरहाइड्रिसिटी या hyperhydricity)।
5. यदि 'डी नोवो' ('de novo') पुनर्जनन का उपयोग किया जाता है तो आनुवंशिक परिवर्तन का जोखिम।
6. आज तक सभी फसलों के साथ बड़े पैमाने पर प्रसार (mass propagation) नहीं किया जा सकता है। अनाज (cereals) में बहुत कम सफलता मिली है।
7. पुनर्जनन अक्सर संभव नहीं होता है, खासकर वयस्क वुडी पौधे (woody plant) सामग्री के साथ।
8. रूटिंग (rooting) को प्रेरित करने में अधिक समस्याएं।
9. टिशू कल्चर से मूल पौधे की समान वृद्धि नहीं हो सकती है। प्रत्येक कर्तोतक की इन विट्रो विकास दर और परिपक्वता अलग-अलग होती है। इस प्रकार फूलों की फसल उत्पादन (floriculture crop production) के लिए उपयोग नहीं किया जा सकता है जहां एकरूपता (uniformity) महत्वपूर्ण है।

पादप ऊतक संवर्धन के लिए बागवानी उपयोग (Horticultural uses for plant tissue culture)

1. कृन्तकीय बड़े पैमाने पर प्रवर्धन: यहां महत्वपूर्ण बात यह है कि अत्यधिक बड़ी संख्या में पौधों का उत्पादन किया जा सकता है। प्रारंभिक कटिंग से प्रति वर्ष 10000 पौधे प्राप्त करने के बजाय, कोई एक प्रारंभिक कर्तोतक से प्रति वर्ष 1,000,000 से अधिक पौधे प्राप्त कर सकता है।
2. प्रसार करने के लिए मुश्किल या धीमे पौधे (Difficult or slow to propagate plants): सूक्ष्म प्रवर्धन उत्पादकों को उन पौधों के उत्पादन को बढ़ाने में सक्षम बनाता है जो आम तौर पर बहुत धीरे-धीरे फैलते हैं जैसे कि नार्सिसस और अन्य बल्बनुमा फसलें।
3. नई किस्मों का परिचय (Introduction of new cultivars): उदाहरण डच आईरिस (Dutch iris)। प्रतिवर्ष 5 संतति बल्ब (daughter bulbs) प्राप्त करें। नई किस्मों की व्यावसायिक मात्रा (commercial quantities) तैयार होने में 10 साल लगते हैं। प्रति तना खंड (stem section) 100-1000 बल्ब प्राप्त कर सकते हैं।
4. बीज उत्पादन के लिए मूल पौधों के रूप में उपयोग किए जाने वाले बाँझ संकरों का वानस्पतिक प्रवर्धन। उदाहरण के लिए गोभी।
5. विकृति विज्ञान (Pathology) - वायरस, बैक्टीरिया, कवक आदि को खत्म करना: ऊष्मा उपचार (heat treatment) और मेरिस्टेम संवर्धन (meristem culture) का उपयोग करें। आलू, कार्नेशन, मम, जेरेनियम, लहसुन, जिप्सोफिला के लिए नियमित रूप से उपयोग किया जाता है।
6. जर्मप्लाज्म का भंडारण (Storage of germplasm): आम तौर पर अब तक का एकमात्र सफल तरीका उन्हें रेफ्रिजरेटर में रखना है। धीमा हो जाता है, लेकिन जीनोटाइप में परिवर्तन को समाप्त नहीं करता है।

प्रश्न (Questions)

1. अलैंगिक जनन द्वारा किसी किस्म की आनुवंशिक रूप से समान प्रतियों के गुणन को ………………. कहा जाता है।
2. प्रकृति में, कृन्तकीय प्रवर्धन ………………. द्वारा होता है।
3. असंगजनन ………………. द्वारा होता है।
4. वानस्पतिक प्रवर्धन ………………. द्वारा होता है।
5. ऊतक संवर्धन का लाभ/के लाभ ………………. है/हैं।
6. सूक्ष्म प्रवर्धन में चरणों की कुल संख्या ………………. है।
7. ………. चरण में मातृ पौधों की तैयारी शामिल है।
8. ………. चरण में मातृ पौधों की तैयारी शामिल है।
   (a) कृन्तकीय प्रवर्धन (b) असंगजनन (c) वानस्पतिक प्रवर्धन (d) उपरोक्त में से कोई नहीं
   (a) वानस्पतिक प्रवर्धन (b) असंगजनन (c) a और b दोनों (d) उपरोक्त में से कोई नहीं
   (a) अर्धसूत्रीविभाजन और निषेचन के बिना बीज का विकास (b) वानस्पतिक भागों से नए पौधों का पुनर्जनन (c) a और b दोनों (d) उपरोक्त में से कोई नहीं
   (a) अर्धसूत्रीविभाजन और निषेचन के बिना बीज का विकास (b) वानस्पतिक भागों से नए पौधों का पुनर्जनन (c) a और b दोनों (d) उपरोक्त में से कोई नहीं
   (a) एक ही पौधे से बड़ी संख्या में सत्य-प्रकार के पौधे (true-to-type plantlets) का उत्पादन (b) कम समय की आवश्यकता (c) कम स्थान की आवश्यकता (d) उपरोक्त सभी
   (a) 3 (b) 4 (c) 5 (d) 6
   (a) चरण 0 (b) चरण 1 (c) चरण 2 (d) चरण 3
9. ऊतक संवर्धन में चरण 0 है
   (a) चरण 0 (b) चरण 1 (c) चरण 2 (d) चरण 3
   (a) प्रारंभिक चरण (b) संवर्धन की शुरुआत (c) गुणन (d) प्ररोह में जड़ आना
10. ऊतक संवर्धन में चरण 1 है
    (a) प्रारंभिक चरण (b) संवर्धन की शुरुआत (c) गुणन (d) प्ररोह में जड़ आना
11. ऊतक संवर्धन में चरण 2 है
    (a) प्रारंभिक चरण (b) संवर्धन की शुरुआत (c) गुणन (d) प्ररोह में जड़ आना
12. ऊतक संवर्धन में चरण 3 है
    (a) प्रारंभिक चरण (b) संवर्धन की शुरुआत (c) गुणन (d) प्ररोह में जड़ आना
13. ऊतक संवर्धन में चरण 3 है
    (a) प्रारंभिक चरण (b) संवर्धन की शुरुआत (c) गुणन (d) प्रत्यारोपण
14. ऊतक संवर्धन में चरण 3 है
    (a) प्रारंभिक चरण (b) संवर्धन की शुरुआत (c) गुणन (d) प्रत्यारोपण
15. वायरस मुक्त पौधे के उत्पादन के लिए उपयुक्त कर्तोतक ………….. है।
    (a) प्ररोह शीर्ष (b) पत्ती का टुकड़ा (c) तने का टुकड़ा (d) उपरोक्त में से कोई नहीं
16. ऊतक संवर्धन में कर्तोतक की कटी हुई सतह से निक्षालित फेनोलिक यौगिकों के ऑक्सीकरण से ………….. होता है।
    (a) माध्यम का भूरा होना (b) माध्यम का काला होना (c) माध्यम का सफेद होना (d) उपरोक्त में से कोई नहीं
17. ऊतक संवर्धन में कर्तोतक की कटी हुई सतह से निक्षालित फेनोलिक यौगिकों के ऑक्सीकरण से ………….. होता है।
    (a) माध्यम का भूरा होना (b) माध्यम का काला होना (c) माध्यम का सफेद होना (d) उपरोक्त में से कोई नहीं
18. माध्यम का भूरा होना ………….. में एक आम समस्या है।
    (a) वुडी प्रजातियों से वयस्क ऊतक (b) वुडी प्रजातियों से किशोर ऊतक (c) a और b दोनों (d) उपरोक्त में से कोई नहीं
19. ऊतक संवर्धन में महत्वपूर्ण चरण है
    (a) प्रारंभिक चरण (b) संवर्धन की शुरुआत (c) गुणन (d) प्ररोह में जड़ आना
20. ऊतक संवर्धन में, गुणन किसके माध्यम से होता है?
    (a) कैलस (b) अपस्थानिक कली निर्माण (c) उन्नत कक्षीय शाखाकरण (d) उपरोक्त सभी