Blotting techniques are categorized by the target macromolecule transferred and immobilized onto solid support membranes (nitrocellulose or positively charged nylon):
Southern blot: Genomic DNA is transferred to the membrane to detect DNA sequences and transgene copy number.
Northern blot: Cellular RNA (mRNA) is immobilized on the membrane and probed to evaluate gene expression and transcript size.
Western blot: Proteins are immobilized on the membrane and probed with antibodies.
Therefore, in Northern hybridization, the RNA sample is immobilized on the membrane (Option 2).
Determining transgene copy number is accomplished via Southern hybridization or digital PCR, not Northern hybridization.
विभिन्न ब्लॉटिंग तकनीकों में झिल्ली (Nylon या Nitrocellulose) पर स्थिर किए जाने वाले लक्ष्य अणु निम्नलिखित हैं:
सदर्न ब्लॉटिंग (Southern blotting): इसमें DNA को झिल्ली पर स्थिर कर विशिष्ट जीन या ट्रांसजीन प्रतिलिपि संख्या की पहचान की जाती है।
नॉर्दर्न ब्लॉटिंग (Northern blotting): इसमें RNA प्रतिदर्श को झिल्ली पर स्थिर (Immobilized) किया जाता है और विशिष्ट प्रोब से संकरण कराकर जीन अभिव्यक्ति और अनुलेख का आकार मापा जाता है।
वेस्टर्न ब्लॉटिंग (Western blotting): इसमें प्रोटीन को झिल्ली पर स्थानांतरित किया जाता है।
ट्रांसजीन की प्रतिलिपि संख्या सदर्न ब्लॉटिंग द्वारा ज्ञात की जाती है, नॉर्दर्न द्वारा नहीं।
अतः नॉर्दर्न संकरण में RNA प्रतिदर्श को झिल्ली पर स्थिर किया जाता है (विकल्प 2)।
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Q.7
ICAR AIEEA PG Plant Biotechnology 09 July 2023 (Shift 1) Paper (Q.51)
Southern hybridization: Verifies stable genomic integration, intactness, and copy number of an introduced foreign transgene in host plant DNA -> (A) - (III).
Western blotting: Uses specific primary and secondary antibodies to detect the presence and molecular mass of a target protein of interest -> (B) - (I).
Y-2H (Yeast Two-Hybrid system): In vivo molecular genetic screen used to detect and characterize protein-protein interactions, such as between two transcription factors -> (C) - (IV).
Mass spectrometry (MS/MS): Measures mass-to-charge ratios of peptide fragments to deduce amino acid sequence and identify unknown proteins -> (D) - (II).
Thus, the correct match is (A) - (III), (B) - (I), (C) - (IV), (D) - (II) (Option 4).
सदर्न संकरण (Southern hybridization): पादप जीनोम में ट्रांसजीन के सफल समाकलन (Integration) तथा प्रतिलिपि संख्या की पुष्टि करता है -> (A) - (III)।
वेस्टर्न ब्लॉटिंग (Western blotting): एंटीबॉडीज की सहायता से लक्षित प्रोटीन की उपस्थिति और आकार की पहचान करता है -> (B) - (I)।
Y-2H (यीस्ट टू-हाइब्रिड प्रणाली): दो प्रोटीनों अथवा ट्रांसक्रिप्शन कारकों के मध्य परस्पर भौतिक क्रिया (Protein-protein interaction) का परीक्षण करती है -> (C) - (IV)।
मास स्पेक्ट्रोमेट्री (Mass spectrometry): पेप्टाइड टुकड़ों के द्रव्यमान/आवेश ($m/z$) का विश्लेषण कर पेप्टाइड अनुक्रम का निर्धारण करती है -> (D) - (II)।
अतः सही सुमेलन (A) - (III), (B) - (I), (C) - (IV), (D) - (II) (विकल्प 4) है।
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Q.8
ICAR AIEEA PG Plant Biotechnology 09 July 2023 (Shift 1) Paper (Q.59)
Schiff's Reagent: Used in the classic Feulgen reaction, where mild acid hydrolysis exposes aldehyde groups on deoxyribose sugars that react with decolored leukofuchsin (Schiff's reagent) to produce a magenta color specific for DNA -> (A) - (III).
Central Dogma: Formulated by Francis Crick, stating that genetic sequence information flows from nucleic acids to proteins ($ ext{DNA} \rightarrow ext{RNA} \rightarrow ext{Protein}$) and cannot be transferred back from protein to nucleic acid -> (B) - (I).
Chromosome: The eukaryotic chromosome is a nucleoprotein complex primarily composed of genomic DNA and basic Histone proteins -> (C) - (IV).
Ultraviolet light of 2600 \AA (260 nm)\lt /b\gt : Purine and pyrimidine ring conjugated double bonds in \lt b\gt DNA\lt /b\gt exhibit characteristic peak UV absorbance at $260\text{ nm}$ ($2600\text{ \AA}$) -> (D) - (II).
Thus, the correct match is (A) - (III), (B) - (I), (C) - (IV), (D) - (II) (Option 4).
शिफ अभिकर्मक (Schiff's Reagent): इसका उपयोग फ्यूलगेन अभिक्रिया (Feulgen reaction) में किया जाता है, जहाँ तनु अम्ल द्वारा DNA से उत्पन्न एल्डिहाइड समूह शिफ अभिकर्मक से क्रिया करके मैजेंटा गुलाबी रंग देते हैं -> (A) - (III)।
सेंट्रल डोग्मा (Central Dogma): फ्रांसिस क्रिक द्वारा प्रतिपादित सिद्धांत, जिसके अनुसार आनुवंशिक सूचना का प्रवाह न्यूक्लिक अम्ल से प्रोटीन ($ ext{DNA} \rightarrow ext{RNA} \rightarrow ext{प्रोटीन}$) की दिशा में होता है -> (B) - (I)।
गुणसूत्र (Chromosome): यूकैरियोटिक गुणसूत्र मुख्य रूप से DNA और क्षारीय हिस्टोन प्रोटीनों के जटिल संघनन से बनते हैं -> (C) - (IV)।
2600 एंगस्ट्रॉम ($260\text{ nm}$) का पराबैंगनी प्रकाश:DNA में उपस्थित प्यूरीन और पिरिमिडीन क्षारकों के कारण अधिकतम पराबैंगनी अवशोषण $260\text{ nm}$ ($2600\text{ \AA}$) पर होता है -> (D) - (II)।
अतः सही सुमेलन (A) - (III), (B) - (I), (C) - (IV), (D) - (II) (विकल्प 4) है।
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Q.9
ICAR AIEEA PG Plant Biotechnology 09 July 2023 (Shift 1) Paper (Q.71)
Southern Blotting: Involves capillary or vacuum transfer of resolved DNA fragments from an agarose gel matrix onto a solid nitrocellulose or nylon membrane -> (A) - (IV).
ELISA: Enzyme-Linked Immunosorbent Assay relies on an enzyme reporter (e.g., horseradish peroxidase) converting a colorless substrate into a colored chromogenic product for quantitative spectrophotometric detection -> (B) - (I).
Gel Electrophoresis: Analytical separation technique where negatively charged DNA fragments migrate toward the positive anode through an agarose matrix based on molecular weight (size) and charge -> (C) - (III).
PCR: Polymerase Chain Reaction enzymatically amplifies specific target DNA fragments billions of times in vitro -> (D) - (II).
Thus, the correct match is (A) - (IV), (B) - (I), (C) - (III), (D) - (II) (Option 2).
सदर्न ब्लॉटिंग (Southern Blotting): एगारोज जेल से DNA खंडों को नाइट्रोसेल्युलोज अथवा नायलॉन झिल्ली पर स्थानांतरित करने की विधि है -> (A) - (IV)।
एलिसा (ELISA): एंजाइम-संबद्ध प्रतिरक्षा परीक्षण में एंजाइम (जैसे HRP) क्रियाधार को रंगीन उत्पाद में बदलता है जिससे प्रकाशीय घनत्व मापा जाता है -> (B) - (I)।
जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस: विद्युत क्षेत्र में DNA के ऋणावेश तथा आण्विक आकार के आधार पर खंडों को अलग करने की तकनीक है -> (C) - (III)।
पीसीआर (PCR): डीएनए पॉलीमरेज़ की सहायता से पात्रे (In vitro) विधि द्वारा लक्षित DNA खंडों का घातीय प्रवर्धन (Amplification) करता है -> (D) - (II)।
अतः सही सुमेलन (A) - (IV), (B) - (I), (C) - (III), (D) - (II) (विकल्प 2) है।
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Q.10
ICAR AIEEA PG Plant Biotechnology 09 July 2023 (Shift 1) Paper (Q.74)
The hybridoma technique was invented in 1975 by Georges Köhler and César Milstein (awarded the 1984 Nobel Prize in Physiology or Medicine).
The method involves somatic cell hybridization by fusing specific antibody-secreting splenic B lymphocytes from an immunized animal with immortal myeloma (cancerous B cell) partner cells in the presence of PEG.
The resulting hybrid cells (hybridomas) inherit both the immortal growth capacity of myelomas and the monospecific antibody-producing capacity of B cells.
Cultured in selective HAT medium, individual clones secrete uniform, epitope-specific monoclonal antibodies (mAbs) used extensively in diagnostics, therapeutics, and research.
हाइब्रिडोमा तकनीक (Hybridoma technique): 1975 में जॉर्जेस कोहलर और सीज़र मिल्सटीन द्वारा खोजी गई थी (जिसके लिए उन्हें 1984 में नोबेल पुरस्कार मिला)।
इस तकनीक में प्रतिजन-उत्तेजित बी-लिम्फोसाइट्स (स्प्लेनोसाइट्स) का संलयन अमर मायलोमा (कैंसरस प्लाज्मा) कोशिकाओं के साथ कराया जाता है।
निर्मित संकर कोशिकाओं को 'हाइब्रिडोमा' कहते हैं, जिनमें अनिश्चित काल तक विभाजित होने और एक ही विशिष्ट प्रतिजन एपिटोप के विरुद्ध एकल एंटीबॉडी बनाने की क्षमता होती है।
इन कोशिकाओं द्वारा उत्पादित समान एंटीबॉडीज को मोनोक्लोनल एंटीबॉडी (Monoclonal antibody - mAb) कहा जाता है।
अतः सही उत्तर मोनोक्लोनल एंटीबॉडी (विकल्प 1) है।
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