Plant Tissue Culture Systems Practice Questions (Q11-14) - Plant Biotechnology

ICAR PG Plant Biotechnology 14 Jul 2023Shift 1

MCQ (Single Correct) +4 −1

Which of the following is an example of a scorable marker?

निम्नलिखित में से कौन सा स्कोर करने योग्य मार्कर का उदाहरण है?

Ampicillin एम्पीसिलीन β-glucuronidase β-ग्लूकुरोनिडेज Kanamycin कानामाइसीन Neomycin नियोमाइसिन

Classification of genetic markers in plant transformation:

Selectable markers (e.g., ampicillin, kanamycin, neomycin, hygromycin resistance genes) confer survival to transformed cells on selective cytotoxic media, directly killing non-transformed cells.
Scorable markers (also known as screenable or reporter genes, such as gusA encoding β-glucuronidase, gfp encoding green fluorescent protein, and luc encoding luciferase) produce a visible color, fluorescence, or luminescent signal allowing qualitative or quantitative visual scoring of transformed tissues without killing non-transformants.

Therefore, β-glucuronidase (GUS) is a scorable marker.

सिलेक्टेबल बनाम स्कोरेबल (रिपोर्टर) मार्कर:

चयन योग्य (Selectable) मार्कर: जैसे कानामाइसीन, नियोमाइसिन, एम्पीसिलीन प्रतिरोधी जीन, जो गैर-रूपांतरित कोशिकाओं को मारकर केवल रूपांतरित कोशिकाओं को जीवित रहने देते हैं।
स्कोर करने योग्य (Scorable / Reporter) मार्कर: जैसे $\beta$-ग्लूकुरोनिडेज (GUS जीन) और GFP, जो X-Gluc सबस्ट्रेट के साथ नीला रंग या प्रतिदीप्ति उत्पन्न करते हैं, जिससे रूपांतरित ऊतकों की पहचान की जा सकती है।

अतः $\beta$-ग्लूकुरोनिडेज एक स्कोरेबल मार्कर है।

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ICAR PG Plant Biotechnology 14 Jul 2023Shift 1

MCQ (Single Correct) +4 −1

Which of the following cannot be used for confirmation of positive clones?

सकारात्मक क्लोनों की पुष्टि के लिए निम्नलिखित में से किसका उपयोग नहीं किया जा सकता है?

Colony hybridization कॉलोनी संकरण Colony PCR कॉलोनी पीसीआर Growing transformants on selection media चयन माध्यम पर ट्रांसफॉर्मैंट्स को उगाना Growing transformants under low temperature कम तापमान पर ट्रांसफॉर्मैंट्स को उगाना

Validation methods for recombinant clones:

Colony hybridization uses sequence-specific labeled nucleic acid probes to directly identify colonies containing the insert of interest.
Colony PCR amplifies the cloned insert directly from bacterial lysate using vector- or gene-specific primers.
Selection media (e.g., antibiotic-containing plates or blue-white screening) selects and screens recombinant transformants.
Growing transformants at low temperature does not differentiate between recombinant and non-recombinant or vector-only clones, and is not a molecular screening technique.

Therefore, growing transformants under low temperature cannot be used to confirm positive clones.

सकारात्मक पुनर्योगज क्लोनों की पुष्टि की विधियां:

कॉलोनी संकरण: विशिष्ट लेबल किए गए प्रोब द्वारा वांछित जीन वाले क्लोनों की सटीक पहचान करता है।
कॉलोनी पीसीआर: कॉलोनी को सीधे प्रवर्धित करके इन्सर्ट की उपस्थिति की पुष्टि करता है।
चयन माध्यम (एंटीबायोटिक प्लेट): ट्रांसफॉर्मैंट्स के चयन में प्रयुक्त होता है।
कम तापमान पर ट्रांसफॉर्मैंट्स को उगाना: यह क्लोन की पुष्टि करने की कोई आणविक विधि नहीं है।

अतः विकल्प 4 सही उत्तर है।

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Match the Following +4 −1

Match List-I with List-II:

Choose the correct answer from the options given below:

सूची-I को सूची-II से सुमेलित कीजिए:

नीचे दिए गए विकल्पों में से सही उत्तर का चयन कीजिए:

List - I सूची - I A		List - II सूची - II I
A	Amplification of a known DNA sequence ज्ञात डीएनए अनुक्रम का प्रवर्धन	I	RT-PCR आरटी-पीसीआर
B	Amplification of cDNA sequence सीडीएनए अनुक्रम का प्रवर्धन	II	Competent cells सक्षम कोशिकाएं
C	Selection of transformed cells रूपांतरित कोशिकाओं का चयन	III	PCR पीसीआर
D	CaCl2 CaCl2	IV	Colony PCR कॉलोनी पीसीआर
E		V	Plasmid isolation प्लास्मिड पृथक्करण

(A) - (I), (B) - (V), (C) - (II), (D) - (IV) (A) - (I), (B) - (V), (C) - (II), (D) - (IV) (A) - (III), (B) - (IV), (C) - (I), (D) - (II) (A) - (III), (B) - (IV), (C) - (I), (D) - (II) (A) - (III), (B) - (I), (C) - (IV), (D) - (II) (A) - (III), (B) - (I), (C) - (IV), (D) - (II) (A) - (II), (B) - (I), (C) - (IV), (D) - (V) (A) - (II), (B) - (I), (C) - (IV), (D) - (V)

Standard recombinant DNA techniques:

Amplification of a known DNA sequence is achieved using standard Polymerase Chain Reaction (PCR) -> (III).
Amplification of expressed cDNA from RNA is achieved via Reverse Transcription-PCR (RT-PCR) -> (I).
Rapid screening and selection of transformed bacterial colonies containing recombinant inserts is performed using Colony PCR -> (IV).
Cold $\text{CaCl}_2$ treatment neutralizes membrane charges to prepare chemically Competent Cells for heat-shock transformation -> (II).

Therefore, the correct match is (A) - (III), (B) - (I), (C) - (IV), (D) - (II).

डीएनए तकनीकों का सुमेलन:

ज्ञात डीएनए अनुक्रम का प्रवर्धन: मानक पीसीआर (PCR) द्वारा किया जाता है -> (III)।
सीडीएनए (cDNA) अनुक्रम का प्रवर्धन: आरटी-पीसीआर (RT-PCR) द्वारा आरएनए से रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन के माध्यम से किया जाता है -> (I)।
रूपांतरित कोशिकाओं का चयन: क्लोन की पुष्टि हेतु कॉलोनी पीसीआर (Colony PCR) किया जाता है -> (IV)।
$\text{CaCl}_2$: जीवाणु कोशिकाओं को रूपांतरण हेतु सक्षम (Competent cells) बनाने के लिए प्रयुक्त होता है -> (II)।

अतः सही मिलान (A) - (III), (B) - (I), (C) - (IV), (D) - (II) है।

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